Bepaling van polyethyleenglycol door gelpermeatiechromatografie
1Inleiding
Doel: Bepaling van het moleculaire gewicht en de verdeling van polyethyleenglycol (PEG) door middel van een hoogwaardige gelpermeatiechromatografie (GPC).
Metode:
Xtimate SEC-120, 5 μm, 7,8x300 mm gelpermeatiechromatografische kolom
Differentiële brekingsindex-detector (RID)
Mobiele fase: ultrazuiver water
Stroom: 1,0 ml/min
Temperatuur van de kolom: 35 °C;
Injectievolume: 10 μl.
De kalibratiecurven worden vastgesteld en de moleculaire massa en de verdeling van elk monster worden berekend met behulp van GPC-software.
Resultaten: De lineariteit van PEG is goed wanneer het moleculaire gewicht tussen 400 en 2000 ligt.de RSD-waarde van de retentietijd is 0.105% en de RSD-waarde van het piekgebied is 0,335%.
Conclusie: Hoogwaardige gelpermeatiechromatografie (GPC) is een betrouwbare methode voor de bepaling van het moleculair gewicht en de verdeling van PEG,met de voordele van nauwkeurigheid en hoge reproduceerbaarheid wanneer het wordt gebruikt voor de evaluatie van de polydispersiteit eigenschap van polymeerverbindingen.
Sleutelwoorden: HPLC, GPC, RID, Polymer, Polyethyleenglycol
2. Experimentele methode
2.1 Instrumentenconfiguratie
Tabel 1 Lijst van de configuratie van een hoogwaardige vloeibare chromatograaf
| - Nee, niet echt. |
Modulair |
Qty |
| 1 |
Hoogwaardige vloeibare chromatografie LC3200-serie |
1 |
| 2 |
PB3200 Binaire pomp |
1 |
| 3 |
RID3300 |
1 |
| 4 |
CT3200 Kolomoven |
1 |
| 5 |
AS3200 Autosampler |
1 |
2.2 Testomstandigheden
Chromatografische kolom: Xtimate SEC-120,5μm,7,8x300mm
Kolomtemperatuur: 35°C
Detector: RID
Stroom: 1,0 ml/min.
Mobiele fase: water
Injectievolume: 10μL
2.3 Instrument/reagentia en verbruiksartikelen
Reagentia:
Ultrazuiver water
De norm: PEG400; PEG2000; PEG6000; PEG10000; PEG20000
Hulpapparatuur
Analytische balansen
Eenheid voor de extractie van oplosmiddelen
Ultrasone reiniger
Experimentele materialen
Filtermembraan: waterfiltermembraan 0,45 μm
2.4 Voorbereiding van de PEG-norm
Pipetteer 0,20 g elk van de PEG400-, PEG2000-, PEG6000, PEG10000- en PEG20000-normen, voeg 10 ml water toe om op te lossen, meng goed en bereid de concentratie van de te testen monsters van 20 mg/ml voor.
3Resultaten en bespreking
3.1 Verschillende normen voor moleculair gewicht
Figuur 1 Chromatogram van PEG400
Tabel 1 Chromatografische parameters van PEG400
| - Nee, niet echt. |
Verbindingen |
Behoudstijd |
Piekgebied |
Nummer van de theriacale plaat |
Vervolgfactor |
| 1 |
PEG400 |
10.315 |
501.732 |
2346 |
1.185 |
Figuur 2 Chromatogram van PEG2000
Tabel 2 Chromatografische parameters van PEG2000
| - Nee, niet echt. |
Verbindingen |
Behoudstijd |
Piekgebied |
Theoretisch kentekennummer |
Vervolgfactor |
| 1 |
PEG2000 |
8.659 |
499.892 |
1926 |
1.230 |
Figuur 3 Chromatogram van PEG6000
Tabel 3 Chromatografische parameters van PEG6000
| - Nee, niet echt. |
Verbindingen |
Behoudstijd |
Piekgebied |
Theoretisch kentekennummer |
Vervolgfactor |
| 1 |
PEG6000 |
7.215 |
499.482 |
|
1.171 |
Figuur 4 Chromatogram van PEG10000
Tabel 4 Chromatografische parameters van PEG10000
| - Nee, niet echt. |
Verbindingen |
Behoudstijd |
Piekgebied |
Theoretisch kentekennummer |
Vervolgfactor |
| 1 |
PEG10000 |
6.612 |
483.657 |
2550 |
1.265 |
Figuur 5 Chromatogram van PEG20000
Tabel 5 Chromatografische parameters van PEG20000
| - Nee, niet echt. |
Verbindingen |
Behoudstijd |
Piekgebied |
Theoretisch kentekennummer |
Vervolgfactor |
| 1 |
PEG20000 |
6.081 |
497.803 |
1103 |
1.799 |
Figuur 6 Overlappende chromatogrammen van verschillende moleculaire gewichten
Opmerking: Uit bovenstaande gegevens blijkt dat de retentietijd van PEG20000 6,081 minuten is en PEG400 10,315 minuten, grotere moleculen worden eerst geëluteerd en kleinere moleculen later.
3.2 Herhaalbaarheid
Figuur 7 Overlappingschromatogrammen voor herhaalbaarheid van PEG6000 (n=6)
Tabel 7 Herhaalbaarheid Chromatografische parameters van PEG6000 (n=6)
| - Nee, niet echt. |
Monsters |
Behoudstijd |
Piekgebied |
| 1 |
6000 |
7.233 |
498.821 |
| 2 |
6000 |
7.234 |
503.367 |
| 3 |
6000 |
7.225 |
499.891 |
| 4 |
6000 |
7.221 |
499.560 |
| 5 |
6000 |
7.219 |
501.374 |
| 6 |
6000 |
7.215 |
499.482 |
| Gemiddeld |
- |
7.225 |
500.416 |
| RSD ((%) |
- |
0.105 |
0.335 |
De RSD van de retentietijd is 0,105% en de RSD van het piekgebied is 0,335% voor 6 injecties van PEG6000.
3.3 Standaardcurven
Figuur 8 Standaardcurven Chromatogrammen van verschillende moleculaire gewichten
Tabel 8 Standaardcurven Chromatografische parameters van verschillende moleculaire gewichten
Opmerking: het moleculaire gewicht en de verdelingsresultaten van elk monster worden berekend met behulp van GPC-software.000, en de lineaire correlatiecoëfficiënt is 0.999.
4Conclusies
Deze polyethyleenglycol (PEG) -test wordt uitgevoerd met gelchromatografie met behulp van een hoogwaardige vloeibare chromatograaf van de LC3200-serie met een detector met differentiële brekingsindex.de retentietijd van PEG20000 is 6.081 minuten, en PEG400 is 10.315 minuten, grotere moleculen worden eerst geëluteerd en kleinere moleculen worden later geëluteerd. De herhaalbaarheid is goed. De RSD van retentietijd is 0.105% en de RSD van het piekgebied is 0De lineariteit van het PEG-moleculaire gewicht is goed in het bereik van 400 tot 20.000, en de lineaire correlatiecoëfficiënt is 0.9999. Hoogwaardige gelpermeatiechromatografie (GPC) is een betrouwbare methode voor de bepaling van het moleculair gewicht en de verdeling van PEG,die de voordelen heeft van nauwkeurige en reproduceerbare resultaten wanneer het wordt gebruikt voor de evaluatie van de polydispersiteit eigenschap van polymeerverbindingen.
Opmerking: het monster moet langer dan 12 uur op kamertemperatuur worden gelaten en voorzichtig worden gemengd, geen ultrasone werking of krachtig schudden om de oplosbaarheid te versnellen.
Uw bericht moet tussen de 20-3.000 tekens bevatten!
