2024-10-22
Bepaling van 6-methylcoumarine in cosmetica door vloeibare chromatografie
1.1 Instrumentenconfiguratie
Tabel 1 Lijst met configuratie van vloeibare chromatografie
- Nee, dat is niet waar. | Module | Qty |
1 | PB3210 Binaire pomp | 1 |
2 | CT3400 Kolomoven | 1 |
3 | AS3210 Autosampler | 1 |
4 | UV-detector | 1 |
5 | NovaChrom SC18 4,6*250 mm, 5 μm | 1 |
6 | SmartLab-werkstation | 1 |
1.2 Experimentele methode
1.2.1 Reagentia
Tabel 2 Lijst van reagentia
- Nee, dat is niet waar. | Reagentia | Zuiverheid |
1 | Methanol | Chromatografische graad |
2 | 6-methylcoumarine | 99% |
3 | Ammoniumdiwaterstoffosfaat | AR |
4 | Fosforzuur | GR |
1.2.1.1 6-methylcoumarine standaardvoorraadoplossing (1000 mg/l): Neem een passende hoeveelheid 6-methylcoumarine standaard,opgelost en het volume met methanol vastgemaakt en bereid tot een concentratie van 1000 mg/l standaardstamsoplossing.
1.2.1.2 6-methylcoumarine standaard werkoplossing:Pipetteer een passende hoeveelheid 6-methylcoumarine standaardstammoplossing en verdun met methanol om een reeks werkkrommen te bereiden met concentraties van 0.1 mg/l, 0,5 mg/l, 1,0 mg/l, 3,0 mg/l, 5,0 mg/l en 10,0 mg/l.
1.2.1.3 Bufferoplossing van natriumdiwaterstoffosfaat: Neem 3,12 g natriumdiwaterstoffosfaat, voeg water toe om op te lossen en verdun tot 1000 ml en stel de pH van fosforzuur in op 3.5.
1.2.2 Chromatografische voorwaarden
Tabel 3 Chromatografievoorwaarden
Chromatografische kolom | NovaChrom SC18 4,6*250 mm 5 μm | ||
Mobiele fase | A: methanol,B: bufferoplossing van natriumdihydrogenfosfaat | ||
Stroompercentage | 1 ml/min | ||
Temperatuur van de kolom | 35°C | Waallengte | 275 nm |
Injectievolume | 10 μl |
Tabel 4 Programma voor gradiëntelutie
Tijd ((min) | Mobiele fase A | Mobiele fase B |
0 | 55 | 45 |
11 | 55 | 45 |
12 | 90 | 10 |
40 | 90 | 10 |
41 | 55 | 45 |
50 | 55 | 45 |
1.2.3 Voorbehandeling van het monster
Neem 1 g (nauwkeurig tot 0,001 g) van het monster in een volumetrische kolf van 10 ml, voeg 5 ml methanol toe, wervel en schud om het monster volledig met de extractieoplossing te mengen, ultrasonextractie gedurende 20 minuten,gekoeld tot kamertemperatuur en vervolgens met methanol op 10 ml vastgemaakt, gemengd en vervolgens in centrifugebuizen overgebracht, gedurende 5 minuten bij 5000 r/min gecentrifugeerd,en de supernatant gefilterd door de 0.45 μm organisch membraan, en vervolgens te testen.
2Het resultaat van het experiment.
2.1 Geschiktheid van het systeem
Figuur 1 10 mg/l Chromatogram van normen
Tabel 5 Testgegevens van 10 mg/l-normen
Verbindingen | Behoudstijd | Piekgebied | Theoretisch kentekennummer |
6-methylcoumarine | 11.168 | 574.285 | 15854 |
Opmerking:Het chromatogram en de gegevens tonen aan dat 6-methylcoumarine een goede piekvorm heeft en dat er geen andere pieken rond de doelpiek zijn en dat het theoretische platennummer hoog is,die voldoet aan de experimentele eisen.
2.2 Standaardcurve
Figuur 2 Testresultaat van de standaardcurve
Opmerking: het chromatogram toont aan dat de R-waarde van de correlatiecoëfficiënt van de 6-methylcoumarinecurve boven 0 ligt.9999, die voldoet aan de experimentele vereisten.
2.3 Herhaalbaarheid
Figuur 3 Herhaalbaarheidskromatogram van 3 mg/l Standaarden van 6 injecties
Tabel 6 Herhaalbaarheidsgegevens van 3 mg/l Standaarden van 6 injectiesTabel 6 Herhaalbaarheidsgegevens van 3 mg/l Standaarden van 6 injectiess
6-methylcoumarine |
- Nee, dat is niet waar. | Behoudstijd | Piekgebied |
1 | 11.159 | 177.710 | |
2 | 11.161 | 176.711 | |
3 | 11.142 | 177.128 | |
4 | 11.152 | 176.985 | |
5 | 11.150 | 177.469 | |
6 | 11.149 | 177.629 | |
RSD ((%) | 0.061 | 0.222 |
Opmerking: Volgens de gegevens in bovenstaande tabel is de RSD van retentietijdherhaalbaarheid van 6-methylcoumarine 0,061%, en de RSD van piekgebiedherhaalbaarheid 0,222%.De herhaalbaarheid is goed en voldoet aan de experimentele vereisten.
2.4 Detectiegrens
Figuur 4 Testchromatogram van 0,02 mg/l Normen
Tabel 7 Testgegevens van 0,02 mg/l normen
Verbindingen | Behoudstijd | Piekgebied | SNR |
6-methylcoumarine | 11.153 | 1.208 | 19.296 |
Opmerking: Op basis van de bovenstaande gegevens wordt als detectiegrens 3 keer de signaal/geluidsverhouding berekend en werd vastgesteld dat de detectiegrens van 6-methylcoumarine 0,004 mg/l is.Het voldoet aan de experimentele eisen..
2.5 Testresultaat van een cosmetisch monster
Figuur 5 Testchromatogram van een cosmetisch monster
Opmerking: 6-methylcoumarine werd niet gedetecteerd in een cosmetisch monster.
2.6 Aandacht
Bij het gebruik van een centrifuge met hoge snelheid moet er voor worden gezorgd dat de buizen symmetrisch geplaatst zijn en dat de totale massa van de buizen aan tegengestelde zijden gelijk is.
3Conclusies
De in dit artikel geïntroduceerde analysemethode, met verwijzing naar de Veiligheid en technische normen voor cosmetica bij de detectie van 6-methylcoumarine,door middel van Wayeal hoogwaardige vloeibare chromatografie LC3200 serie met UV-detectorHet resultaat van het experiment toont aan dat de piekvorm van 6-methylcoumarine goed is in de aanpassingsvermogenstest en dat er geen andere pieken rond de doelpiek zijn.en het theoretische nummer van de platen is hoogDe curvecorrelatiecoëfficiënt R-waarde is hoger dan 0.9999De RSD van retentietijdherhaalbaarheid van 6-methylcoumarine is 0,061%, en de RSD van piekgebiedherhaalbaarheid is 0,222%, wat een goede herhaalbaarheid toont..004 mg/l. Alle bovenstaande testresultaten voldoen aan de voorschriften van het instrument volgens de standaardmethode.
Stuur uw vraag rechtstreeks naar ons