Bepaling van salidroside in geneesmiddelen door middel van hoogwaardige vloeibare chromatografie (HPLC)

Abstract

Doel: Bepaling van salidroside in geneesmiddelen door middel van hoogwaardige vloeibare chromatografie (HPLC)

methode: C18-kolom, 4,6*250 mm, 5 μm;

golflengte: 275 nm;

mobiele fase A: water; mobiele fase B: methanol;

Stroomgehalte 1,0 ml/min;

Temperatuur: 30°C;

Injectievolume: 5 μl.

Er werd een standaardcurve vastgesteld en de inhoud van het doel werd berekend volgens de externe standaardmethode.

Sleutelwoorden: HPLC, UV-detector, kruiden, Salidroside

1. Experimentele methode

1.1 Instrumentenconfiguratie

Wayeal LC3200 serie HPLC

Tabel 1 Systemconfiguratie van HPLC

1.2 Testomstandigheden

Kolom: C18, 5μm, 4,6*250 mm

Temperatuur: 30°C

Golflengte: 275nm

Stroom: 1,0 ml/min

Mobiele fase: A: water; B: methanol

Injectievolume: 5μL

Verlaagstand:

1.3 Instrument, reagentia en verbruiksartikelen

Reagentia: ultrazuiver water, methanol ((GR)

Normen: Salidroside (99,7%)

Hulpparaat: chemische balans; oplosmiddelfilter; ultrasone reinigingsmiddelen

Experimentele materialen: filtermembraan: filtermembraan in waterfase 0,45 μm

1.4 Voorbereiding van oplossingen

1.4.1 Standaardoplossingen: Neem een geschikte hoeveelheid salidroside-standaard in een volumetrische kolf en los het op in methanol, zodat de concentratie 0,0084125 mg/ml, 0,016825 mg/ml, 0,03365 mg/ml, 0,025 mg/ml, 0,016825 mg/ml, 0,03365 mg/ml, 0,034 mg/ml, 0,035 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml.0673 mg/ml, 0,1346 mg/ml, 0,2692 mg/ml, 0,673 mg/ml.

1.4.2 Voorbereiding van het monster: Neem 1,0022 g monster 1 in een volumetrische kolf, voeg methanol toe en oplos tot 25 ml. Neem 1,0794 g monster 2 in een volumetrische kolf, voeg methanol toe en oplos tot 25 ml.

2 Resultaten en discussie

2.1 Geschiktheid van het systeem

Figuur 1 Chromatogram van Salidroside-standaard

Tabel 2 Chromatografieparameters van Salidroside-normen

Analyse: De testresultaten van salidroside waren goed met symmetrische pieken en een hoog theoretisch platennummer.

2.2 Standaardcurve

Figuur 2 Op elkaar geplaatst chromatogram van Salidroside-standaardoplossingen

Figuur 3 Krommevergelijking en correlatiecoëfficiënt van salidroside standaardoplossingen

Analyse: het lineaire bereik van de salidroside standaardcurve is goed, r>0.999.

2.3 Herhaalbaarheid

Figuur 4 Herhaalbaarheidskromatogram van Salidroside-normen (n=6)

Tabel 3 Herhaalbaarheid Chromatografische parameters Tabel van Salidroside (n=6)

Analyse: 6 injecties van 0,2692 mg/l salidroside vertonen een goede reproduceerbaarheid en de RSD-waarde van de retentietijd is 0,055% en de RSD-waarde van het piekgebied is 0,340%.

2.4 Monster 1

Figuur 5 Chromatogram van monster 1

Tabel 4 Chromatografische parameters van monster 1

Analyse: het salidrosidegehalte in monster 1 was 0,061933 mg/l, berekend volgens de standaardcurve-vergelijking.

2.5 Proef 2

Figuur 6 Chromatogram van monster 2