Bepaling van Rhodamine B in chilipoeder door WAYEAL LCMS-TQ9200 LCMS/MS-systeem

Rhodamine B (ook wel Rose Red B of Basic Violet 10 genoemd) is een synthetische basisfluorescerende kleurstof die behoort tot de chemische klasse xanthene.Deze stof zelf heeft een heldere roze-rode kleur en is gemakkelijk oplosbaar in polaire oplosmiddelen zoals water en ethanol.Aanvankelijk werd het veel gebruikt in industriële velden, waaronder textiel, drukwerk en fluorescerend etiketteren.Sommige gewetenloze handelaren hebben het illegaal toegevoegd aan voedselproducten voor kleurdoeleindenHet is een belangrijke verontreinigende stof die de voedselveiligheid in gevaar brengt.
Rhodamine B is duidelijk giftig voor het menselijk lichaam. Het kan het lichaam binnenkomen via het spijsverteringsstelsel of de huid, waardoor het normale fysiologische metabolisme wordt verstoord.het een potentieel carcinogeen en mutageen risico vormtAls gevolg hiervan is het geclassificeerd als een niet-eetbare stof die door meerdere landen in voedsel is verboden.en het detectiepercentage blijft aanhoudend hoog in verschillende kruiden en verwerkte voedingsmiddelen.

In deze aanvraagnoot: a liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for the determination of Rhodamine B in food was established using the WAYEAL LCMS-TQ9200 liquid chromatography-tandem mass spectrometry systemDeze methode zorgt voor een efficiënte extractie, precieze scheiding en gevoelige kwantificatie van het doel-analyte en elimineert tegelijkertijd effectief interferenties in de voedingsmatrix.Het biedt betrouwbare technische ondersteuning voor snelle screening en nauwkeurige kwantificatie van rhodamine B in levensmiddelen, waardoor een doeltreffend toezicht op de voedselveiligheid wordt vergemakkelijkt.

Sleutelwoorden: voedselveiligheid, Rhodamine B, LCMS/MS

1. Instrumenten en reagentia

1.1 Instrumentenconfiguratie

Tabel 1 Lijst met instrumentconfiguratie

1.2 Lijst met reagentia en normen

Tabel 2 Reagentia en standaardlijst

1.3 Experimentele materialen en hulpmiddelen

Vortexmixer

Centrifuge met hoge snelheid

Analytische balans

een vermogen van niet meer dan 50 W,

Nitrogeenafdampers

Orbitale shaker

2. Experimentele methode

2.1 Bereiding van de oplossing

2.1.1 0,1% mierenzuur in water: overgeven van 1 ml mierenzuur in 500 ml water, grondig mengen en tot een eindvolume van 1000 ml met water brengen.

2.1.2 0,1% mierenzuur in acetonitril: overgeven van 1 ml mierenzuur in 500 ml acetonitril, grondig mengen en fixeren tot een volume van 1000 ml met acetonitril.

2.1.3 50% methanol in water: 500 ml methanol worden nauwkeurig in een volumetrische kolf van 1 liter overgebracht en vervolgens met water op volume bevestigd.

2.1.4 50% methanol in water met 0,1% mierenzuur: overgeven van 1 ml mierenzuur in 500 ml methanol met 50% in water, zorgvuldig mengen en verdunnen tot een volume van 1000 ml met 50% methanol in water.

2.1.5 5% ammoniak in methanol: 5 ml ammoniakoplossing worden overgebracht naar een 100 ml volumetrische kolf, tot het volume met methanol verdund en grondig gemengd.

2.2 Voorbehandeling van het monster

2.2.1 Monsterafneming

Weeg 1 g chilipoedermonster nauwkeurig in een 50 ml plastic centrifugebuis, voeg er nauwkeurig 10,0 ml 50% methanol waterige oplossing met 0,1% mierenzuur aan toe en meng goed.Voeg twee keramische homogenisatoren toeCentrifugeer bij 8000 r/min gedurende 10 min. Draag 3 ml supernatant over (extractschaal) en filter door een 0-laag.45 μm organisch-fasefiltermembraan vóór zuivering.

2.2.2 Proefzuivering

NovaPre MCX Solid Phase Extraction (SPE) Cartridge Conditioning: vóór gebruik, activeren van de cartridge met 3 ml methanol en 3 ml water.

Verplaats nauwkeurig 1,0 ml van het extract op de NovaPre MCX solid phase extraction (SPE) cartridge.en 3 ml methanolHet doel-analyte wordt geëluteerd met 6 ml ammoniak in methanoloplossing en het eluat wordt verzameld. Het eluat wordt verdampt tot bijna droogheid onder een stroom stikstof bij 45°C. Het residu wordt opgelost in 0.5 ml van de initiële mobiele fase, filteren door een 0,22 μm organisch-fasefiltermembraan en injecteren vervolgens het filtraat voor instrumentale analyse.

2.3 Experimentele omstandigheden

2.3.1 HPLC-voorwaarden

Chromatografische kolom: C18, 1,7 μm, 2,1 × 50 mm;
Mobiele fase: fase A: 0,1% mierenzuur in water; fase B: 0,1% mierenzuur in acetonitril;
Stroomsnelheid: 0,4 ml/min;
Kolomtemperatuur: 40 °C;
Injectievolume: 1 μl.

2.3.2 Massespektrometrievoorwaarden

Tabel 3 Parameters voor samengestelde massaspectrometrie

Opmerking: * kwantifier ion.

3Het resultaat van het experiment.

3.1 Normen Chromatogram

De detectie van Rhodamine B werd binnen 7 minuten voltooid. Zoals in figuur 1 wordt getoond, vertoonde de samengestelde piek een goede piekvorm en een bevredigende respons.voldoet aan de voorschriften voor experimentele bepaling.

Figuur 1 Chromatogram van Rhodamine B

3.2 Lineair bereik

Een passende hoeveelheid van de standaardwerkoplossing van Rhodamine B werd nauwkeurig overgedragen en verdund met de initiële mobiele fase om de standaardcurve voor te bereiden.De afwijking tussen de lineaire resultaten en de bekende concentraties lag binnen de maximaal toelaatbare afwijkingDe coëfficiënt van bepaling (R2) was groter dan 0.999, wat een goede lineariteit aangeeft.

Figuur 2 Rodamine B-standaardcurve

3.3 Kwantificatie- en detectielimiet

Bij deze methode werden de detectiegrens (LOD) en de kwantitatiegrens (LOQ) voor rhodamine B vastgesteld op respectievelijk 0,1 ng/mL en 0,5 ng/mL.De overeenkomstige signaal/geluidsverhoudingen (S/N) worden in de onderstaande tabel samengevat.De S/N-ratio's bij de LOD overschreden 3, terwijl die bij de LOQ overschreden 10.

Tabel 4 Grenzen van kwantificatie en grens van detectie

Figuur 3 Signal-ruisverhouding bij LOD voor Rhodamine B (0,1 ng/mL)

Figuur 4 Signal-ruisverhouding bij LOQ voor rhodamine B (0,5 ng/mL)

3.4 Herhaalbaarheid

Standaardoplossingen in drie concentraties (0.5De relatieve standaardafwijkingen (RSD's) van de retentietijd en het piekgebied voor Rhodamine B bij lage, lage en lage doses,middelmatig, en hoge concentraties waren allemaal binnen 5%, wat voldoet aan de experimentele vereisten.

Tabel 5. Herhaalbaarheidstest voor rhodamine B bij lage, middelgrote en hoge concentraties

Figuur 5 Chromatogrammen van 6 opeenvolgende injecties van 0,5 ng/ml Rhodamine B

Figuur 6 Chromatogrammen van 6 opeenvolgende injecties van 2 ng/ml Rhodamine B

Figuur 7 Chromatogrammen van 6 opeenvolgende injecties van 5 ng/ml Rhodamine B

3.5 Spike Recovery

Voor het monster A werd een standaardoplossing toegevoegd om de concentratie van Rhodamine B met 2 ng/ml te verhogen.voldoet aan de criteria voor de aanvaarding van de methode.

3.6 Overdracht

Na het injecteren van de standaardoplossing van 10 ng/ml werd een blanco oplosmiddel geïnjecteerd om de overdracht te beoordelen.De overdracht in het blanco was minder dan 10% van de laagste kalibratiestandaard (0.1 ng/mL), die aan de experimentele eisen voldoen.

Figuur 8 Blank chromatogram van de verbinding

3.7 Proefproef

De Rhodamine B-concentratie in monster A lag onder de detectiegrens (MDL).

Figuur 9 Chromatogram van Rhodamine B in monster A

4Conclusies

In dit onderzoek werd een vloeibare chromatografie-tandem massa spectrometrie (LC-MS/MS) methode voor de bepaling van Rhodamine B ontwikkeld met behulp van het WAYEAL LCMS-TQ9200 systeem.De verkregen gegevens toonden aan dat de methode chromatografische pieken met een goede symmetrie produceerde en geen staartDe coëfficiënt van bepaling (R2) was groter dan 0.999De herhaalbaarheid (RSD) bij lage, middelgrote en hoge concentraties was binnen 5%, en de overdracht in de leegte was minder dan 10% van de laagste kalibratie standaard..Deze resultaten geven aan dat de methode, in combinatie met het WAYEAL LC-MS/MS-systeem, in staat is om te voldoen aan de routinematige kwalitatieve en kwantitatieve detectievereisten voor doel-analyten.