Bepaling van Nitrosamine Verontreinigingen in Propranololhydrochloride Tabletten door Vloeistofchromatografie

Sleutelwoorden: propranolol, hoogwaardige vloeibare chromatografie, nitrosamineverontreinigingen

1Instrumenten en reagentia

1.1 Configuratielijst van HPLC-systeem

1.2 Reagentia en standaardoplossingen

Tabel 2 Reagentia en standaardoplossingen

1.3 Experimentele materialen en hulpmiddelen

Ultrasone reiniger

Vortexmixer

2. Experimentele methode

2.1 Bereiding van de oplossing

2.1.1 2 mol/l Natriumhydroxideoplossing: Neem 4 g natriumhydroxide, los het op in 50 ml water en meng het goed.

2.1.2 Acetonitrilwaterzwavelzuur (55:45:0.1) Mengsel: Neem 1,6 g natriumdodecylsulfaat en 0,31 g tetrabutylammoniumdihydrogenfosfaat, voeg 1 ml zwavelzuur, 450 ml water en 550 ml acetonitril toe.3 met 2 mol/l natriumhydroxideoplossing, en goed mengen.

2.1.3 oplosmiddel: hetzelfde als in de mobiele fase.

2.1.4 Lineaire oplossing: weeg nauwkeurig een passende hoeveelheid N-nitroso-propranolol als referentiestandaard,oplossen en verdunnen met mobiele fase om een oplossing te verkrijgen die ongeveer 200 ng per 1 ml bevat als standaardvoorraadoplossingVervolgens wordt een passend volume van de basisoplossing nauwkeurig overgebracht naar zes 100 ml volumetrische kolven, verdund tot aan het merkteken met mobiele fase.en goed mengen om een standaardreeks werkkrommen met concentraties van 0 te bereiden.8ng/mL, 1ng/mL, 2ng/mL, 3ng/mL, 4ng/mL en 6ng/mL.

2.1.5 Referentiestandaardoplossing: weeg nauwkeurig een passende hoeveelheid N-nitroso-propranolol-referentiestandaard,oplossen en verdunnen met mobiele fase om een oplossing te bereiden die ongeveer 2 ng N-Nitroso-propranolol per 1 ml bevat als standaardreferentieloplossing.

2.2 Voorbereiding van het monster

2.2.1 Proefproefoplossing: weeg nauwkeurig een passende hoeveelheid fijn poedervormige propranololhydrochloride tabletten, los ze op en verdun ze met mobiele fase om een oplossing te bereiden die ongeveer 0.27 mg propranolol per 1 ml als monsteroplossing.

2.2.2 nauwkeurigheid Oplossing: weeg ongeveer 297 mg fijn poederige propranololhydrochloride tabletten nauwkeurig in een 100 ml volumetrische kolf.Voeg een passende hoeveelheid N-nitroso-propranolol referentiestandaardoplossing toe, oplossen en tot op het merk verdunnen met mobiele fase om een 100% gespikeerd monster te bereiden.

3Het resultaat van het experiment.

3.1 Specificiteit

Figuur 2 Chromatogram van de specificiteit

Opmerking: het oplosmiddel belemmert de detectie van N-nitroso-propranolol niet,en de chromatografische pieken van andere onzuiverheden in de testoplossing beïnvloeden ook niet de bepaling van de onzuiverheid N-Nitroso-propranolol.

3.2 Lineaire test

Figuur 3 Standaardcurve van de onzuiverheid van N-nitroso-propranolol

Opmerking: Uit de proefresultaten blijkt dat de correlatiecoëfficiënt (R) van de testcurve voor de onzuiverheid van N-nitroso-propranolol groter is dan 0.999, voldoet aan de voorschriften van de test.

3.3 Herhaalbaarheidstest

Figuur 4 Chromatogrammen van zes herhaalde injecties voor 2 ng/ml standaard

Tabel 3 Gegevens van zes herhaalde injecties voor 2 ng/ml-standaard

Opmerking: Zoals in de bovenstaande tabel weergegeven, is de retentietijdherhaalbaarheid van N-nitroso-propranolol 0,043%, en is de peak area herhaalbaarheid 0, 464%, wat wijst op een goede herhaalbaarheid.

3.4 Genauigheidscontrole

Figuur 5 Overladen nauwkeurige chromatogrammen van N-nitroso-propranolol in tabletten

Tabel 4 nauwkeurigheid van Propranolol Hydrochloride Tabletten (N-Nitroso-propranolol)

Opmerking: De terugvordering van N-nitroso-propranolol in zes monsters varieerde van 96,98% tot 104,71%, met een gemiddelde terugvordering van 101,38%.

3.5 LOD-test

Figuur 6 Testchromatogram van N-nitroso-propranolol bij 2 ng/ml standaardconcentratie

Tabel 5 Referentietestgegevens van N-nitroso-propranolol bij 2 ng/ml standaardconcentratie

Opmerking: Op basis van de testgegevens voor de N-nitroso-propranolol-referentiestandaard bij een concentratie van 2 ng/ml in bovenstaande tabel,de theoretische detectiegrens voor N-nitroso-propranolol wordt berekend als 0.151ng/mL met een signaal/geluidsverhouding van 3:1 als detectiegrenscriterium.

3.6 Een merk tablet testen

Figuur 7 Testchromatogram van een merktablet

Opmerking: N-Nitroso-propranolol werd niet gedetecteerd in de merktabletten.

4Conclusies

A study on the nitrosamine impurity N-nitroso-propranolol in propranolol hydrochloride tablets was conducted in accordance with the FDA's recently published guidance document on establishing acceptable intake levels for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRI)Gezien de maximale dagelijkse dosis van dit product (200 mg), mag de controlegrens in tabletten niet hoger zijn dan 7 mg/ dag..De validatie van de methode werd uitgevoerd met behulp van de high-performance vloeibare chromatografie (HPLC) -serie van Wayeal®, uitgerust met een UV-detector.De tabletmonsters werden geanalyseerd met behulp van de gevalideerde detectiemethodeAlle bovenstaande gegevens voldoen aan de eisen van de farmacopee voor instrumentatie.